发表qPCR文章标准-MIQE及ISO20395
2017年Bustin等调查MIQE执行情况显示:“说一套,做一套:RT-qPCR是分子生物研究中缺乏重复性的典范”。虽然MIQE指南公布8年,大量qPCR文章依然不遵循MIQE,面临撤稿风险。
在 qPCR 实验之前,可使用分光光度法分析 DNA/RNA 样品的纯度,可以很容易的避免扩增抑制的发生。以 260 和 280 nm 处的吸光度值之比(与核酸与其他分子之比相对应)作为纯度评估。纯的DNA比值为1.8 , RNA为 2.0,若纯度不够则应对样品进行纯化。同样,您也可以使用不同的样品制备方法。如果额外的纯化步骤不能解决问题,则样品可能本身就难以处理。在这种情况下,可以考虑使用更耐受抑制剂的 qPCR mix
2024年2月19日 09:47
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