抗鼠/兔通用型免疫组化检测试剂盒
 

1ml    300元

5ml    1300元

产品说明
该免疫组化试剂盒利用最新的聚合技术将多个过氧化物酶（HRP）分子及抗鼠及抗兔免疫球蛋白
（IgG）偶联到多聚物上，形成的聚合物（二抗）具有放大信号增加敏感度、减少非特异性背景特点。
与兔或者鼠一抗进行搭配使用，结合后再与DAB 反应，可得棕色显色。该反应体系不含生物素和链霉
亲和素，不受内源性生物素影响，背景极低；只需要二步反应，即可完成实验过程。
 
产品列表

编号  名称  规格
1  抗兔/鼠HRP标记聚合物  1ml
2  DAB原液  50μl
3  DAB稀释液50×  2.5ml(1.25ml×2) 
  
产品应用
DAB工作液配制：
实验前，将DAB原液与DAB稀释液按照1：50比例配制本次实验所需要的用量，混匀后避光备用。
 
实验步骤：（以石蜡切片染色程序为例）
1) 将石蜡切片脱蜡至水：先将切片置于二甲苯中10分钟，2次。然后依次在100%，95%，80%和60%
乙醇，每级放置5分钟。再用蒸馏水浸洗3次，每次3分钟。
2) 抗原修复：根据抗原抗体情况，必要时对切片进行抗原热修复：加入柠檬酸缓冲液后，将切片放置
微波炉，中火修复2次，每次5分钟。结束后在柠檬酸缓冲液自然冷却，35分钟。然后用TBS冲
洗3次，每次1分钟。
 3) 加入3%H2O2，室温10 分钟以灭活内源性酶。TBS冲洗3次，每次1分钟。
4) 封闭：用TBS制备5%封闭血清，室温 1小时。注意血清来源种属要与二抗来源种属一致。（如无
合适血清，可用PBS（或TBS）制备5%BSA）
5) 孵育一抗：滴加适当稀释的一抗（兔或鼠一抗），37℃1~2 小时或 4℃过夜。TBS冲洗3次，每次
1分钟（一抗的稀释度、孵育时间、温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度
不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间；背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间。）
6) 孵育二抗：滴加50-100μL抗兔/鼠HRP标记聚合物，37℃孵育30 分钟，TBS冲洗3次，每次1分
钟。
7) DAB显色： 滴加预制好的显色剂DAB工作液50-100微升，室温孵育5-10分钟, 或者镜下控制反
应时间。蒸馏水洗涤。
8) 苏木素复染2-3分钟，然后蒸馏水冲洗
9) 各级酒精（60-100%）脱水,每级5分钟。取出后置于二甲苯10分钟，2次。用封片胶封片、显微
镜观察。
 
备注：如果冰冻切片直接染色结果不理想时,可以参照石蜡切片对切片进行热修复，方法与石蜡切片
2-8步骤相同。
 
产品保存：
该试剂盒应在2-8度保存，并在有效期（一年）内使用，切忌反复冻融。
 
注意事项：
1.在抗原修复及后续免疫组化染色过程中都需避免组织切片干燥，保持湿润；
2.良好染色效果的获得很大程度上取决于标本制备和正确的实验方法，建议每批实验设置阴阳性对
照；
3.本说明书所提供的操作方法仅供参考，如遇特殊情况需要根据实际情况进行调整。